1. 生物学特性
1.1历史及形态学
犬细小病毒（canineparvovirus,CPV）属细小病毒科，细小病毒属。该病毒有2种不同的型CPV-1型和CPV-2型。CPV-1型又称犬微小病毒，于1967年由Binn等人从健康犬粪便中分离。可引起幼犬肺炎、心肌炎和肠炎，或经胎盘感染引起胚胎吸收和胎儿死亡[1]。CPV-2型作为犬的一个新型病毒首次分离于1978年，与猫泛白细胞减少症病毒FPV很相近，基因组有98%的同源性[2]；致病性与抗原性与CPV-1有差异[3]。
CPV-2是无囊膜，单负股的DNA病毒，粒子为等轴的20面体，电镜下呈圆形或六边型[1,3]。基因组长5323bp,由3个结构蛋白VP1、VP2和VP3组成，其中VP2是主要的核衣壳蛋白，在病毒感染及诱导机体免疫反应中发挥重要作用，决定着病毒的宿主范围以及组织嗜性[4]。
1.2抗原性
CPV-2 为主要抗原型。CPV-2 随着对不同宿主的适应和变异，不断产生新抗原变异型CPV-2a、CPV-2b 和 CPV-2c（a&b）逐步替代了 CPV-2 的流行。目前，VP2 蛋白的第426 位氨基酸（Asp/Glu/Asn）能划分CPV-2a、CPV-2b和CPV-2c型病毒，VP2蛋白的第297 位氨基酸（Ser/Ala）是新CPV-2a和CPV-2b的分类依据。因此，CPV-2 VP2 基因被广泛用于犬细小病毒分子流行病学调查研究[5]。
1.3稳定性
CPV-2对多种理化因素和常用消毒剂具有较强的抵抗力，在4-10℃存活6个月，37℃存活2周，56℃存活24小时，80℃存活15分钟，在室温下保存3个月感染性仅轻度下降，在粪便中可存活数月至数年。该病毒对乙醚，氯仿，醇类有抵抗力，对紫外线，福尔马林，次氯酸钠，氧化剂敏感，故本病具有极强的传染性[1,3]。
1.4易感群体
CPV-2主要感染犬，尤其幼犬，传染性极强，死亡率也高。一年四季均可发病，以冬，春多发。饲养管理条件骤变，长途运输，寒冷，拥挤均可促使本病发生。病犬是主要传染源，呕吐物，唾液，粪便中均有大量病毒[1,3]。康复犬仍可长期（180d-270d）通过粪便向外排毒[6]。其中感染4～7d,每克粪便中的病毒滴度可达109TCID50[7]。人，虱，苍蝇和蟑螂可成为CPV的机械携带者。健康犬与病犬或带毒犬直接接触，或经污染的饲料和饮水通过消化道引起感染[1,3]。有报道打过疫苗后28天，犬粪便中可以通过PCR测出病毒。因此，免疫后粪便中会排毒[8]。
1.5 流行病学
CPV-2 是引起犬腹泻的主要病原，感染率可达到29.2%～84%[9-10]，发病率的差异与地域、季节、年龄、犬种及血统差异相关[5]。在黑龙江省牡丹江地区采集的具有腹泻症状犬的40份粪便样品中，CPV-2 的阳性率为50%[5]，该结果与国内其他的报道类似[11-12]。2012-2013年北京地区检测1209份犬粪便样本中，CPV阳性样本232份，CPV阴性样本977份，阳性率19.2％[13]。
1.5.1季节相关性
犬细小病毒病发病具有明显的季节性，冬春季是本病的高发期。江苏泰州地区2010-2011年冬春季发病数占发病总数的 69.3%；夏季发病较少，仅占发病总数的7.7%，其原因可能是寒冷季节呼吸道感染较为严重，导致犬抵抗力下降明显，增加了发病几率。
1.5.2年龄相关性
犬细小病毒病发病与犬年龄有一定相关性，以 3-12 月龄高发。1-2月龄的仔犬发病数占发病总数的1.5%，这是因为初生仔犬通过采食母乳，获得母源抗体，从而获得了抵抗犬细小病毒的能力；而3-12月龄发病幼犬占总数的78.5%，这与幼犬母源抗体从3月龄开始逐渐降低，到4月龄左右几乎全部消失有关，幼犬逐步失去了对犬细小病毒的抵抗力；而到１岁左右，随着年龄的增长，免疫系统逐步完善，辅以定期的预防接种，犬体内抗体水平处在较高的水平，从而降低了犬细小病毒病的发病率。
1.5.3犬种体型相关性
犬发生细小病毒病与犬种体型相关，一般中小型品种犬多发。小型品种犬占发病总数的85%；大型品种犬占发病总数的15%。中小型品种犬的发病率明显高于大型品种犬，可能在相同的致病条件下，大型品种犬参与抵抗病毒的抗体数量高于中、小型品种犬。此外，多数小型品种犬长期作为宠物饲养，而大型品种犬多作为工作犬，故大型品种犬抵抗力相对较强。
1.5.4血统相关性
犬发生细小病毒病与血统有关，纯种犬更易感染细小病毒。纯种犬占发病总数的91.5%，杂交犬占发病总数的8.5%。可能与纯种犬的饲养条件、生活方式优越、锻炼少，抵抗力差有关，而杂交犬因其杂交优势，适应能力较强，故较少发病。
2.致病机理
首先病毒经消化道感染犬，主要攻击犬的上皮细胞和心肌细胞，然后犬分别表现胃肠道症状和心肌炎症状，幼犬多见于心肌炎型。
病毒有一定的潜伏期,侵入机体后被感染的前 2天首先在口咽部复制随着血流传播到其它器官病毒感染的第3d到第5d时会出现病毒血症。
病毒在口鼻迅速传播然后病毒在咽喉部的淋巴组织、肠系膜淋巴组织以及胸腺开始复制，随后感染小肠的肠隐窩，引起犬的腹泻。在严重感染的情况下,常常会出现嗜中性白细胞减少症和淋巴细胞减少症。
犬感染细小病毒后的 3-4 天开始通过粪便向外界排毒，有的犬会排大量红色稀便。有时呈喷射状，此时病毒呈单个散在，传染性最强。而 7-10 天后，动物的肠黏膜产生 Ig A，犬细小病毒特异抗体增多, 可以检测到血清抗体,血清抗体可以在体内保持至少1年[1,3]。
3. 检测方法
很多疾病都会引起犬的呕吐、腹泻，所以通过临床观察很难确诊CPV感染，目前已经建立的检测方法有很多种，有的针对病毒蛋白，有的针对病毒核酸，如电镜、病毒分离(VI)、乳胶凝集试验、血凝试验(HA)、血凝抑制试验(HI)、原位杂交、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)等。Costantina Desario等对其中的几种方法(IC、HA、VI、常规PCR和实时PCR)进行了比较。电镜病毒分离敏感、特异性强，但费时且花费成本较高；凝集试验虽然快速，但敏感性低；HA需和HI配合使用，且需使新鲜的猪红细胞(常用)，不太方便；ELISA既可测抗原，也可检测抗体，便利、快速、敏感、特异性强，其敏感性略低于电镜，而且不能分辨野毒感染或是疫苗免疫效果，当免疫犬感染其他病，其临床症状与CPV相似时，就会出现假阳性反应；随着分子生物学技术的发展，特别PCR技术的成熟，为CPV的检测提供了更为有效可靠的方法。PCR检测敏感性高，特异性强，可分辨野毒感染和疫苗免疫，尤其是结合2 h- 4 h即可检测出病毒核酸，但其对设备要求较高，对于基层工作者相对困难。近年来，利用胶体金标记单克隆CPV表面抗体，制成检测CPV抗原的胶体金检测试纸也开始应用于兽医临床。该方法操作简便快速，结果易于分析判定[1,3]，但是因技术的限制灵敏度较低，不能发现早期低浓度病毒造成的感染，进而错失治愈最佳良机。
而在胶体金基础上发展的时间分辨荧光定量免疫层析技术，既保留了传统检测方法的简单快速优势外，采用荧光微球示踪技术结合时间分辨技术实现了更高灵敏度，更精准定量。该技术在国外已经产业化，而我们国家多依赖于进口，价格十分昂贵。多位科技领先工作者团结协作，开拓创新，实现技术国产化，荣获2003年国家科技进步奖（详细内容可以关注朝云帆健康检测公众号，了解详细POCT技术专题）。
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4. 临床症状
病程在一周左右，抵抗力较高或者打过疫苗的犬的症状较轻，治愈率较高，恢复较快。感染细小是否出现临床症状受年龄和免疫力状况影响。一般幼犬免疫系统发育不全，抵抗力低，失去母源保护的情况下极易易感染发病。高于80%成年犬感染后无症状，感染3-4天后肠道排毒，3周后仍周期性排毒，而犬无症状。
犬细小病毒的自然潜伏期在 5-7天，临床表现肠炎型和心肌炎。肠炎型发病的犬常发生于2-5月龄犬,潜伏期约在 1-2 周,其临床表现为病犬呕吐、腹泻，呕吐物开始为白色泡沫状，继而粘稠少量，逐渐变成黄色，极少数有淡绿色胆汁吐出并且带有血丝。排便次数增多，排黄色或灰黄色粪便，粘稠腥臭。中期表现为频繁呕吐，无食欲，腹泻常呈喷射状，排出番茄汁样粪便带有脱落的肠黏膜，体温可达 40℃。后期的病犬体温下降至常温以下，可视粘膜表现苍白，肛门肌肉松弛，呼吸困难，脱水严重，各个器官衰竭而死。脱水主要表现为眼窝深陷，犬的鼻干燥，皮肤弹性下降，严重者昏迷休克[1,3]。临床上与犬冠状引起的消化道症状极为相似，占消化道疾病原因的主要比例。联合犬的C反应蛋白检测，利用朝云帆时间分辨荧光定量检测仪可以迅速圈定/排除消化道疾病的最大可能性！
5.治疗方法
本病的治疗原则是支持疗法和对症治疗，提高动物的免疫能力，防止患病动物脱水和继发感染。心肌炎型通常发病快，死亡率高，临床病例通常预后不良，对于肠炎型的治疗主要有西药治疗、中药治疗和中西医结合治疗。临床上多应用抗细小病毒病高免血清、细小病毒单克隆抗体、免疫球蛋白、免疫白蛋白和干扰素。生物制品的应用可中和病毒，提高动物机体抵抗力，增加动物的治愈率。补液：患该病的犬因呕吐、腹泻、便血和食欲减退，引起机体的严重脱水、能量损失以及器官衰竭，是病犬死亡的主要原因之一。止吐、止血、止泻。控制继发感染：临床上针对犬细小病毒病的继发感染，可以选用抗生素如氨苄西林、庆大霉素等防止继发细菌感染[1,3]。
6.预防措施
定期消毒，避免交叉感染。如果发现患病犬有呕吐、腹泻的症状，及时进行隔离。
疫苗免疫是预防本病的根本措施，应当选取正规渠道购买的疫苗，以防免疫失败。近年来使用的疫苗大多数是在CPV-2基础上改进的活疫苗，可有效防控犬细小病毒病，也能抵抗变异株如CPV-2b的攻击。当母源抗体不能提供足够的保护(Nicola Decaro等研究认为，母源抗体HI≥80（对应拜奥高抗体滴度S=3）可以提供全面保护)，就会有许多犬在出生后1周内发生感染。中和试验已证明抗原型不同，抗体水平不同，当母源抗体处于最小保护滴度时，这种不同在临床上有可能很重要。同时母源抗体亦干扰免疫接种，从而造成免疫接种失败[3]。
首免一般在 4-6 周龄，进行小犬二联免疫；间隔三周（7-10周）进行二次免疫，免疫四联疫苗；再间隔三周（10-13周），进行四联疫苗免疫，以后每间隔 11 个月免疫一次四联疫苗[14]。是否需要重复接种，则依赖于血清学检测结果即抗体滴度的测定[15]。
7. 指标解读
朝云帆荧光定量试纸检测病原微生物的结果如何解读呢？我们检测的是抗原，即动物体内客观存在的病原量。根据提示发病率的可能性由低到高将病原量区间定义为阴性，携带，弱阳，阳性，强阳。我们携带，弱阳的意义是一般发病率较低，但当犬猫抵抗力低或者下降时也会发病出现临床症状，如犬猫经过长途运输或者突然到新环境内不适应发病很常见。阳性/强阳一般提示发病率比较高，但当犬猫抵抗力强也即抗体水平比较高时，也会不发病，如流浪狗、猫几乎都带毒但是免疫力强，经多例临床检测发现抗体滴度S>6，很少发病。
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刚刚进医院的两个月大泰迪，细小检测结果阳性，抗体（-）水平偏低。送来的时间还算及时，C反+，炎症还好，注意小宝贝继发细菌感染，后续实时监测抗体和C反能帮助判断预后。
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